上海遠(yuǎn)慕生物提供DEAE-瓊脂糖凝膠 FF使用說明書，本司專業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒，動物血清，標(biāo)準(zhǔn)品對照品，培養(yǎng)基，抗體，生化試劑，化學(xué)試劑，染色液，溶液，緩沖液，實(shí)驗(yàn)耗材，作為專業(yè)的生化試劑供應(yīng)商，本司品種成千上萬，咨詢！
DEAE-瓊脂糖凝膠 FF參數(shù)說明
中文名：DEAE-瓊脂糖凝膠 FF
英文名：DEAE Sepharose FF
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：100ml、500ml
粒徑：45~165μm
工作溫度：4~40℃
流速：300~600 cm/h;zui大流速750 cm/h
耐熱：pH7水中120℃30min
耐壓：0.3 MPa
形狀：球形
性狀：本品呈白色，球狀、無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。
保存：密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇)，通風(fēng)、干燥、清潔的地方；不能冷凍。
注意事項(xiàng)：本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸;避免在pH值< 4時長時間暴露(一周,20℃)。
保質(zhì)期：5年
DEAE-瓊脂糖凝膠 FF
DEAE-瓊脂糖凝膠 FF應(yīng)用范圍
DEAE-瓊脂糖凝膠FF是將二乙胺基乙基鍵合在快流速瓊脂糖凝膠上形成的一種弱陰離子交換介質(zhì)；廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。DEAE-瓊脂糖凝膠FF是一種將*胺基烷基季銨基鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的帶有強(qiáng)堿陰離子基團(tuán)的層析分離介質(zhì)；該產(chǎn)品保留了瓊脂糖*的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有離子交換容量高、非特異性吸附少、流速快等特點(diǎn)，廣泛用于蛋白質(zhì)、核酸、多肽及多糖等生物大分子的實(shí)驗(yàn)室規(guī)模制備和生物制藥、生物工程的工業(yè)化制備。
DEAE-瓊脂糖凝膠 FF使用步驟
1、乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
2、無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的*溶脹，然后;
3、鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗只中性;
4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;
5、上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
6、凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可;
7、洗脫方法：可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;
8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。
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